Simon Fontaine

J’ai réalisé de la mutagénèse dirigée sur une lipase
Techniques réalisées:
• Construction de plasmide (par site de restriction & TA cloning), digestion
enzymatique, PCR, electrophorèse
• Extraction et purification de plasmides
• Transformation bactérienne
• Mutagénèse dirigée (Quickchange)
• Expression de la protéine dans E. coli et identification (SDS-Page)

Grande autonomie durant le stage.

J’ai participé à la mise en place de la méthode de séquençage «Paired-end» au sein du laboratoire
en utilisant le séquenceur 454 GS FLX Titanium de Roche.
Techniques réalisées:
• Extraction et purification d’ADN bactérien
• Préparation de banques (nebulization, HydroShear, électrophorèse sur
puces (bioanalyzer 2100 d’Agilent) et quantification d’ADN
• PCR en émulsion
• Finishing (PCR sur ADN génomique en utilisant la méthode de Sanger)

Travail en équipe: J'ai intégré une équipe de 5 personnes.

Mon sujet s’est porté sur l’effet du sulfate de fer sur un champignon pathogène de la vigne.
Techniques réalisées:
• Culture de champignons en milieu liquide et solide en respectant les
conditions de stérilité
• Techniques d’inclusion en résine afin de préparer les échantillons en vu
d’une analyse au microscope